超声波技术是如何高效解决食品中的细菌
超声波技术是一种新兴的食品加工技术,已经被广泛应用于食品加工领域。
而在食品处理过程中,细菌孢子是一种常见的污染源。如今超声波技术已经被证明是一种有效的消除细菌孢子的方法。
#枯草芽孢杆菌#超声波是一种高频机械波,其频率往往在20kHz到MHz之间。它可以在物质中通过传递,来产生压缩和稀释的效果,使细胞结构发生变化,并破坏其中的分子键。这种破坏作用通常会导致微生物的死亡或失活。
一般来说,消灭孢子的过程,通常称为“超声波杀菌”。目前该技术已广泛应用于牛奶、果汁、沙拉酱等食品的生产中。
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超声波分为高频和低频,一般情况下,高频超声波主要用于食品的质量评估,以及对食品物理的化学特性进行分析。
根据一项研究表明,超声波技术可以对杏仁奶中的大肠杆菌O:H7和单核细胞增生李斯特菌等食源性病原体,造成致死和损伤。
于是,为了验证超声波技术除菌的真实性,研究人员又给黑胡椒粒和木薯淀粉,接种了枯草芽孢杆菌营养细胞,并对实验对象进行了除菌研究。
结果显示,经过30分钟处理后,营养细胞计数降低了2.19个对数CFU/g。
不过,值得注意的是,如果仅使用超声波处理,是不能显著降低孢子的数量的。
也就是说,只有将超声波与其他技术进行结合,才能有助于提高微生物的灭活效果,如超声波与热处理(即热超声)和压力(即手套超声)的结合。
然而,在灭活无花果汁中的枯草芽孢杆菌时,研究人员通过流式细胞仪分析发现发现,超声波与热处理联合使用,会破坏细胞膜完整性,使酯酶活性失活,并破坏核酸。
由此可以看出,热超声波法会损伤枯草芽孢杆菌孢子的内膜蛋白,导致质膜通透性,改变细胞内物质泄漏和孢子形成。
但是,当与氢氧化钠和过氧化氢相结合时,研究人员却发现可以达到协同的杀孢效果。
这些研究表明,超声波与其他保鲜技术相结合,可以促进营养细胞和孢子的微生物灭活。表中展示了超声波技术,在食品加工中与其他方法联合使用的广泛应用。
于是,为了增强超声波技术在食品加工和保鲜中的功效,研究人员将此技术与其他技术进行了联合使用。
这其中,超声波与表面活性剂(0.03-0.3%)联合,对生菜和胡萝卜上的蜡样芽孢杆菌(、ATCC和W-1)孢子起到了抑制效果。
结果显示,当仅使用超声波处理时,生菜和胡萝卜上的除菌效果达到了小于0.7log。
但当超声波和表面活性剂联合时,研究人员根据亲水-疏水平衡(HLB)的不同,可以使杀菌效果大大提高,其细菌数量分别减少了2.49和2.22logCFU/g,最关键的是,品质没有受到破坏。
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通常来讲,孢子与营养细胞相比,结构更加复杂,其保护层是由孢子的外壳、皮层和内膜组成,具有较强的保护能力,可以抵抗像热、辐射和化学这样的不良条件。
而通过使用超声波技术,研究人员可以分离、并破坏孢子的多层保护性表面,以及降解蛋白质含量和去激酶活性,从而达到孢子的灭活。
尽管超声波技术与其他技术联合使用,可以灭活腐败和食源性病原微生物,但这个灭活机制仍然存在争议,人们普遍认为声波产生的空化、压力和摩擦,会影响人类的身体健康。
然而,超声波是一种机械波,它的频率通常高于20kHz,即超出人类听力范围。虽然超声波的频率很高,但是它们的能量很小,因此通常被认为是安全的。
除非是长时间接触超声波,或者是高频超声波,才可能对人类身体造成负面影响。例如,某些实验室工作者和医生经常使用超声波仪器,或长时间处于高强度超声波环境中,才可能会对听力产生损伤。
所以根据目前的研究结果,正常情况下,普通人短时间接触低频的超声波,并不会对人体健康造成实质性的影响。
接下来言归正传,在超声处理期间,会生成两类声学腔化。一种是稳态空化,另一种是瞬态空化。
稳态空化是由气泡在几个声周期内的定期振荡引起的;而瞬态空化是由不规则振荡引起的,会导致温度和压力的快速交替。稳态和瞬态空化都能通过细胞损伤和微流动,来促进微生物细胞的灭活。
而由空化产生的冲击波,可以破坏微生物孢子的外壳、细胞壁和内膜,从而导致核心或核材料的释放,破坏其结构的完整性。
当应用于大量或表面的材料时,波通过材料以特定的速度传播,形成粒子的交替压缩和扩张循环。这些循环产生一个负压力,克服了介质之间的分子力,导致形成小型充气气泡或空穴,如图所示。
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声学空化通过物理/机械效应、热效应和化学效应,可以在处理过程中,达到超声空化对微生物灭活的机制。瞬态空化会导致微小喷流、局部热点和自由基分子的生成。
至于稳态空化,则会产生的剪切力,通过微流动引起微生物细胞和酶的压力。
随着介质的膨胀和压缩的交替循环,空穴的收缩、扩张和崩塌,形成了超声波的主要抗菌机制。根据超声波频率的不同,正负压力的交替产生的膨胀或压缩,会导致细胞壁破裂和细胞溶解。
在这个过程中,分子之间平均距离的变化和压力的下降,会导致气泡或蒸汽的形成,当它们转移到高压区域时,会积聚并最终崩溃,导致压力达到0大气压和80°C的高温。
因此,空化会导致细胞壁严重损坏,侵蚀细胞表面,导致微生物灭活。
除了这些,空化过程中还会将水分子分解为自由基(H+和OH-),这些自由基介导着DNA损伤、酶活性破坏、脂质体损伤,以及细胞结构和功能成分的破坏。
研究证明,该技术可在不影响食品质量的情况下,从食品表面剥离出微生物孢子。
当温度达到25℃时,研究人员在1分钟内使用频率20kHz、功率W的超声波,会将蜡样芽孢杆菌孢子的外壳松动,以及降低孢子的亲水性,可以把微生物从.67纳米的大小,减小到.53纳米。
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超声处理对微生物的灭活效果,不仅限于破坏普通微生物细胞,还可对食源性细菌孢子产生负面影响,包括芽孢杆菌和梭状芽孢杆菌等细菌孢子。
将超声技术与其他技术相结合,或作为辅助保藏处理,可增强细胞的分散,并使食源性腐败和致病微生物的抗性孢子失活。
当与热处理技术结合使用时,除了可以增强产气荚膜梭菌,在牛肉浆中的热灭活外,该技术还可以提高橙汁中嗜酸耐热菌孢子的失活效果。
同时,超声波与聚山梨醇酯—20的结合处理,还能有效地降低生菜和胡萝卜上的蜡样芽孢杆菌孢子。
可即便如此,当前有关超声灭活孢子的机制,仍有地方不够清楚。
然而,一些报告却表明,超声处理的杀孢效果,明显受到一系列机制的介导,最初是孢子外壳的脱落,然后是内核的水合和皮层的降解,随后是孢子的细胞内结构损坏、包裹物破坏和皮层受损。
据聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,超声处理后蛋白条带的强度有所降低。研究还观察到,超声可以剥离外壳层,并降低孢子的亲水性。
除了这些,可视化图像分析表明,热超声作用于枯草杆菌孢子的多个部位,包括外皮、皮层和内膜。
研究发现,失活孢子一般会表现出核心蛋白质的丧失,以及改变质膜的通透性。这种对孢子内膜蛋白质或内膜的损伤,会导致细胞内物质的泄漏和最终死亡。
但值得注意的是,在经过热超声处理的孢子中,却没有引起DNA损伤,反而导致了α/β型的小酸溶性芽孢蛋白等重要蛋白质和酶的降解。
当使用SYTO9绿色荧光核酸染色剂和丙碘化物(PI),对经过酸性电解水和超声处理组合进行处理时,蜡样芽孢杆菌孢子的皮层会出现水解,而外壳层会出现剥离的现象,并且,该操作还能破坏孢子结构。
图中是在透射电子显微镜(TEM)下,大肠杆菌细胞经过超声处理和未处理的图像。
明显可以看出,未经处理的细胞具有完整的壁和膜,而超声处理的细胞,经历了细胞壁和膜的破裂,细胞物质的释放和细胞结构的破坏。
这种壁、膜和结构的断裂,可以归因于超声技术中的声波和空化效应的影响。结果证明并确认了超声处理期间,蔬菜细胞和孢子的失活机制。
孢子形成的微生物和细菌,会附着在食品表面上,从而缩短食品的保质期,并引起食品安全问题。
不过,要注意的是,热处理方法是会导致食品的蛋白质变性,以及风味恶化等影响。
可如果将此方法换成超声波技术,那么便可以解决这些问题。如今,通过研究证明,超声波技术已经可以有效地剥离附着在食品表面的细菌,以及孢子形成的微生物,同时超声波技术还不会影响食品的质量。
尽管,有报道称该技术对高度耐性的孢子只具有少量效果。但超声波处理产生的冲击波,如声波、空化、压力和摩擦,在处理过程中明显可以看出,能达到破坏细菌的效果,如芽孢杆菌和酵母菌,以及其他孢子形成微生物的细胞壁、细胞结构和功能材料。
换句话说,在没有异物接触到食品的情况下,只要将超声波的频率范围控制到~50kHz到10MHz内,那么该技术便可以使细菌及其孢子,如苏云金杆菌的灭活率达到99.9%。
此外,该技术也已证明,在85W/cm功率和35°C温度的情况下,超声波是拥有灭活牛奶中,大肠杆菌和李斯特菌的能力。
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由此可以看出,超声波技术在食品加工和工业中的应用,为一些食品企业,提供了一种新颖的解决方案。
与其他非热处理相比,超声波处理是一项相对便宜的技术。未来,超声波技术的应用,将探索与其他非热处理技术的融合,以此获得更加增强和有效的结果。
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